Стромально-васкулярная клеточная фракция: возможности применения в эстетической медицине

Алла Зорина, к. м. н., главный специалист по применению клеточных технологий Института стволовых клеток человека, г. Москва

Вадим Зорин, к. б. н., руководитель отдела регенеративной медицины Института стволовых клеток человека, г. Москва

Регенерация тканей является важнейшей проблемой в эстетической медицине, и на помощь могут прийти клеточные технологии. В настоящее время активно изучаются возможности использования клеточной терапии для решения таких задач, как восстановление объемов и устранение дефектов мягких тканей лица и тела, коррекция рубцовых и других структурных дефектов кожи. Одним из перспективных «клеточных» кандидатов для такой терапии является выделенная из жировой ткани стромально-васкулярная клеточная фракция.

В жировой ткани наряду с адипоцитами (зрелыми клетками жировой ткани) содержатся клетки и других типов – гетерогенная популяция, названная стромально-васкулярной клеточной фракцией (СВКФ). В ее составе стволовые клетки жировой ткани (СКЖТ), эндотелиальные и гладкомышечные клетки кровеносных сосудов и их предшественники, перициты, фибробласты, клетки крови, в том числе гемопоэтические стволовые клетки и лимфоциты.

Ключевым компонентом СВКФ являются СКЖТ: благодаря их способности дифференцироваться в адипогенном направлении происходит самообновление жировой ткани. СВКФ используют ex tempore для усиления регенерации тканей, а также для получения чистого пула СКЖТ посредством культивирования. Для характеризации клеток, входящих в состав СВКФ, служат поверхностные антигены, присутствующие («положительные») или не присутствующие («отрицательные») на этих клетках. Данные антигены называют CD-маркерами.

Способы получения СВКФ

Выделить СВКФ можно двумя способами – ферментативным и неферментативным; в основе обоих лежит разрушение жировой ткани с последующим ее центрифугированием для удаления зрелых адипоцитов и эритроцитов и получения очищенной СВКФ.

Ферментативный способ предусматривает использование ферментов коллагеназы I и II типов, трипсина, диспазы и их аналогов для расщепления жировой ткани.

Неферментативный предполагает механическое воздействие на жировую ткань, например с помощью вибрационного шейкера. Преимущества этого способа выделения СВКФ:
– отсутствие необходимости в ферментах, использование которых не исключает риск негативного воздействия на ткани;
– более низкая стоимость продукта;
– меньшее время, затрачиваемое на получение СВКФ (около 15 минут, при ферментативном способе – 30–120 минут).

Для получения СВКФ используют различные устройства, или девайсы. Действие девайсов отличается по ряду параметров. Большинство устройств рассчитано на получение из 1 мл липоаспирата в среднем от 500 тысяч до 1 миллиона ядросодержащих клеток с жизнеспособностью более 80% и содержанием СКЖТ в выделенной фракции от 1 до 15%. Время, затрачиваемое на выделение СВКФ, варьируется от 15 до 120 минут. Использование ферментов, в частности коллагеназы, приводит к более интенсивному расщеплению внеклеточного матрикса жировой ткани, а значит, к изоляции значительно большего количества ядросодержащих клеток, чем при применении неферментативного способа (до 1,3 миллиона кл/мл жира и до 240 тысяч кл/мл соответственно).

СКЖТ и перициты локализуются преимущественно вокруг малых и среднего размера сосудов жировой ткани. При механическом воздействии, в отличие от ферментативного, большинство этих сосудов остаются в нерасщепленных фрагментах соединительной ткани и элиминируются в ходе процессинга СВКФ. Следовательно, выделенная неферментативным путем СВКФ будет отличаться значительно меньшим содержанием стволовых/прогениторных клеток.

Следует учитывать, что на состав СВКФ может оказывать влияние целый ряд факторов, таких как возраст пациента, методы выделения, фильтрации и другие особенности клеточного процессинга, вследствие чего получаемые образцы СВКФ могут сильно различаться. Поэтому очень важна стандартизация получаемого препарата, которая позволит добиться оптимального соотношения между клеточными популяциями, входящими в состав СВКФ, а соответственно, и высокой клинической эффективности.

Если сравнивать клиническую эффективность СВКФ и чистой популяции СКЖТ (полученной путем культивирования), то СВКФ, благодаря взаимодействию входящих в ее состав клеток, обладает бóльшим терапевтическим потенциалом.

Критерии для СВКФ и СКЖТ

Международным обществом жировой терапии и науки (IFATS, International Federation for Adipose Therapeutics and Science) совместно с Международным обществом клеточной терапии (ISCT, International Society for Cellular Therapy) утверждено первичное руководство для исследователей, работающих с полученными из жировой ткани клеточными продуктами. Цель – разработка международных стандартов, обеспечивающих стандартизацию СВКФ и возможность адекватного сравнительного анализа и воспроизведения результатов проводимых клинических исследований.

Разработка и утверждение критериев, характеризующих СВКФ и СКЖТ, играют важную роль в развитии регенеративной медицины, поскольку стандартизация клеточного материала является необходимым условием для успешного внедрения в практику результатов биомедицинских разработок, основанных на использовании данных клеток.

Применение СВКФ в эстетической медицине

СВКФ при липофиллинге

Клиническая стратегия обогащения жирового трансплантата (липографта) стволовыми клетками получила название «пересадка жировой ткани с использованием клеток». Липографт, используемый при классическом липофиллинге, вследствие особенностей процессинга содержит недостаточное для полноценного приживления количество кровеносных сосудов и стволовых/прогениторных клеток. Дефицит последних, а также высокая восприимчивость зрелых адипоцитов, входящих в состав липографта, к индуцированному гипоксией апоптозу способствуют его существенной (до 80%) резорбции. Поэтому обогащение трансплантата СВКФ может значительно повысить приживаемость и сохранить объем пересаженного жира, максимально снизив его резорбцию.

Клиническая стратегия обогащения жирового трансплантата СВКФ позволяет усовершенствовать классический способ липофиллинга. Кроме того, она расширяет ресурсы реконструктивной хирургии, поскольку значительно повышает эффективность борьбы с повреждениями мягких тканей, ассоциированными с их фиброзом и ишемией, а также коррекции дефектов этих тканей в таких сложных областях, как, например, височная.

Хорошие результаты получены при лечении с применением СВКФ пациентов с местным некрозом, развившимся после введения филлеров на основе гиалуроновой кислоты.

СВКФ при коррекции структурных дефектов кожи

СВКФ применяется для коррекции структурных дефектов кожи в странах Восточной Европы, Японии и Корее (классифицируется как минимально манипулируемый клеточный продукт).

Корейскими учеными показана эффективность применения СВКФ для устранения осложнений, вызванных локальной ишемией. Случайное попадание геля в кровеносный сосуд приводит к обструкции сосуда с последующей локальной ишемией и некрозом окружающих мягких тканей. Особенно часто такие осложнения возникают в области носа и переносицы. Пациентам в течение четырех-семи дней с момента развития ишемии/некроза вводили внутрикожно в область дефекта аутологичную СВКФ, выделенную из 20–50 мл жировой ткани. Результаты исследований подтвердили, что СВКФ способствует быстрому устранению ишемии за счет стимуляции неоангиогенеза и заживлению раны с минимальным риском образования рубца. В корейских клиниках СВКФ активно применяют также с целью ремоделирования процессов рубцевания, особенно после пластических операций на лице.

Заслуживает внимания клинический опыт по применению СВКФ при лечении алопеций. Было проведено клиническое исследование, в котором принимали участие 10 мужчин в возрасте 25–72 лет с андрогенной алопецией. В кожу головы им вводили СВКФ, выделенную механическим способом, в комбинации с плазмой, обогащенной тромбоцитами (PRP). Исследователи отметили активную стимуляцию волосяных фолликулов и значительное увеличение плотности волос (срок наблюдения 12 недель). При этом клинический эффект применения комбинации PRP + СВКФ был значительно более выраженным, чем после применения только PRP.

Заключение

Не вызывает сомнения, что СВКФ представляет собой весьма перспективный клеточный продукт для применения в клинической практике, поскольку:

– относится к минимально манипулируемым клеточным препаратам, которые, благодаря наличию готовых девайсов, можно получить непосредственно в операционной и использовать ex tempоre;

– является богатым источником стволовых/прогениторных мезенхимальных и эндотелиальных клеток с высокими регенеративными возможностями, важнейшие из которых – неоангиогенез и иммуномодуляция.

В связи с этим применение СВКФ обоснованно при коррекции возрастных и рубцовых дефектов кожи, лечении алопеций, а также таких тяжелых осложнений, как ишемия, некрозы, фиброз, при которых стандартные медицинские подходы малоэффективны.

Бесспорно, использование регенеративного потенциала СВКФ позволит значительно расширить возможности терапевтической косметологии и пластической/ реконструктивной хирургии.

Очевидным является также и то, что для получения высокой клинической эффективности необходима стандартизация данного клеточного продукта как в отношении клеточного процессинга, так и в отношении доз и показаний в рамках доказательной медицины. Нормативно-правовая база применения клеточных продуктов требует конкретизации и обновления в соответствии с достижениями современной биологической и медицинской науки.

В России этот вопрос находится на стадии урегулирования – принят закон о биомедицинских продуктах, вступивший в силу в январе 2017 года, который определяет процесс их получения и необходимые стандарты.

 

 

Полная печатная версия:
Архив...